1. Tarkoitus: Tämän menettelyn tavoitteena on tarjota standardoitu menettely aseptisiin toimintoihin ja steriilien huoneiden suojaamiseen.
2. Soveltamisala: biologinen testauslaboratorio
3. Vastuuhenkilö: Laadunvalvonnan valvoja, testaaja
4. Määritelmä: Ei mitään
5. Turvaohjeet
Noudata aseptisia toimenpiteitä ehdottomasti mikrobikontaminaation estämiseksi; käyttäjien on sammutettava UV-lamppu ennen steriiliin huoneeseen menoa.
6. Menettelyt
6.1. Steriilin huoneen tulee olla varustettu steriilillä leikkaussalilla ja puskurihuoneella. Steriilin leikkaussalin puhtauden tulee olla luokkaa 10000. Sisälämpötilan tulee olla 20–24 °C ja kosteuden 45–60 %. Puhtaan työpöydän puhtauden tulee olla luokkaa 100.
6.2. Steriili huone on pidettävä puhtaana, ja roskien kasaaminen sinne on ehdottomasti kielletty kontaminaation estämiseksi.
6.3. Estä ehdottomasti kaikkien sterilointilaitteiden ja viljelyalustojen kontaminaatio. Kontaminoituneiden on lopetettava niiden käyttö.
6.4. Steriilissä huoneessa tulee olla toimivan pitoisuuden omaavia desinfiointiaineita, kuten 5-prosenttista kresoliliuosta, 70-prosenttista alkoholiliuosta, 0,1-prosenttista kloorimetioniiniliuosta jne.
6.5. Steriili huone on steriloitava ja puhdistettava säännöllisesti asianmukaisella desinfiointiaineella sen varmistamiseksi, että steriilin huoneen puhtaus täyttää vaatimukset.
6.6. Kaikki steriiliin huoneeseen tuotavat instrumentit, välineet, astiat ja muut esineet on pakattava tiiviisti ja steriloitava asianmukaisin menetelmin.
6.7. Ennen steriiliin huoneeseen menoa henkilökunnan on pestävä kätensä saippualla tai desinfiointiaineella ja vaihdettava sitten erityiset työvaatteet, kengät, hatut, maskit ja käsineet puskurihuoneessa (tai pyyhittävä kätensä uudelleen 70-prosenttisella etanolilla) ennen steriiliin huoneeseen menoa. Toimenpiteet on suoritettava bakteerikammiossa.
6.8. Ennen steriilin huoneen käyttöä on steriilin huoneen ultraviolettilamppu kytkettävä päälle säteilytystä ja sterilointia varten yli 30 minuutiksi ja puhdas työpöytä on samanaikaisesti kytkettävä päälle ilmapuhallusta varten. Toimenpiteen päätyttyä steriili huone on puhdistettava ajoissa ja steriloitava ultraviolettivalolla 20 minuutin ajan.
6.9. Ennen tarkastusta testinäytteen ulkopakkaus on pidettävä ehjänä eikä sitä saa avata kontaminaation estämiseksi. Ennen tarkastusta desinfioi ulkopinta 70-prosenttisella alkoholilla kostutetuilla vanupalloilla.
6.10. Jokaisen toimenpiteen aikana on tehtävä negatiivinen kontrolli aseptisen toiminnan luotettavuuden tarkistamiseksi.
6.11. Bakteerinestettä imettäessä on käytettävä imupalloa sen imemiseen. Älä kosketa pilliä suoraan suullasi.
6.12. Inokulaationeula on steriloitava liekillä ennen jokaista käyttökertaa ja sen jälkeen. Jäähdytyksen jälkeen viljelmä voidaan inokuloida.
6.13. Pillit, koeputket, petrimaljat ja muut bakteerinestettä sisältävät välineet on liotettava sterilointiämpärissä, jossa on 5-prosenttista Lysol-liuosta desinfiointia varten, ja otettava pois ja huuhdeltava 24 tunnin kuluttua.
6.14. Jos pöydälle tai lattialle on läikkynyt bakteerinestettä, kaada välittömästi 5 % karbolihappoliuosta tai 3 % lysolia saastuneelle alueelle vähintään 30 minuutiksi ennen käsittelyä. Jos työvaatteet ja hatut ovat saastuneet bakteerinesteellä, ne on riisuttava välittömästi ja pestävä korkeapainehöyrysteriloinnin jälkeen.
6.15. Kaikki eläviä bakteereja sisältävät esineet on desinfioitava ennen huuhtelua vesihanan alla. Viemärin saastuttaminen on ehdottomasti kielletty.
6.16. Steriilin huoneen pesäkkeiden lukumäärä on tarkistettava kuukausittain. Pidä puhdas työpöytä auki, ota useita steriilejä petrimaljoja, joiden sisähalkaisija on 90 mm, ja ruiskuta aseptisesti noin 15 ml sulatettua ja noin 45 °C:seen jäähdytettyä ravintoagar-viljelyalustaa. Kiinteytyksen jälkeen aseta se ylösalaisin 30–35 °C:seen. Inkuboi 48 tuntia ℃:n inkubaattorissa. Steriiliyden varmistamiseksi ota 3–5 levyä ja aseta ne työasennon vasemmalle, keskelle ja oikealle puolelle. Avaa kansi ja anna levyjen olla 30 minuuttia, aseta ne ylösalaisin 30–35 °C:n inkubaattoriin 48 tunniksi ja ota ne ulos. Tarkista. Levyllä olevien sekalaisten bakteerien keskimääräinen lukumäärä luokan 100 puhdastilassa ei saa ylittää yhtä pesäkettä, ja luokan 10 000 puhdastilassa keskimääräinen lukumäärä ei saa ylittää kolmea pesäkettä. Jos raja ylittyy, steriili huone on desinfioitava perusteellisesti, kunnes toistuvat tarkastukset täyttävät vaatimukset.
7. Katso luku (Steriiliystarkastusmenetelmä) kohdissa "Lääkehygieeniset tarkastusmenetelmät" ja "Kiinan lääketarkastusstandardit".
8. Jakeluosasto: Laadunhallintaosasto
Puhdastilan tekniset ohjeet:
Kun olemme saaneet steriilin ympäristön ja steriilit materiaalit, meidän on ylläpidettävä steriiliä tilaa voidaksemme tutkia tiettyä tunnettua mikro-organismia tai hyödyntää sen toimintoja. Muuten erilaiset ulkopuolelta tulevat mikro-organismit voivat helposti sekoittua joukkoon. Ilmiötä, jossa epäolennaisia ulkopuolelta tulevia mikro-organismeja sekoittuu, kutsutaan mikrobiologiassa kontaminoiviksi bakteereiksi. Kontaminaation estäminen on kriittinen tekniikka mikrobiologisessa työssä. Täydellinen sterilointi ja kontaminaation estäminen ovat kaksi aseptisen tekniikan osa-aluetta. Lisäksi meidän on estettävä tutkittavien mikro-organismien, erityisesti patogeenisten mikro-organismien tai geneettisesti muunneltujen mikro-organismien, pääsy kokeellisista astioistamme ulkoiseen ympäristöön. Näihin tarkoituksiin mikrobiologiassa on monia toimenpiteitä.
Steriili huone on yleensä pieni, erityisesti mikrobiologian laboratorioon suunniteltu huone. Se voidaan rakentaa levyistä ja lasista. Pinta-alan ei tulisi olla liian suuri, noin 4–5 neliömetriä, ja korkeuden tulisi olla noin 2,5 metriä. Steriilin huoneen ulkopuolelle tulisi sijoittaa puskurihuone. Puskurihuoneen ja steriilin huoneen ovien ei tulisi olla samaan suuntaan, jotta ilmavirta ei pääse tuomaan sisään erilaisia bakteereja. Sekä steriilin että puskurihuoneen on oltava ilmatiiviitä. Sisätilojen ilmanvaihtolaitteissa on oltava ilmansuodattimet. Steriilin huoneen lattian ja seinien on oltava sileät, vaikeasti likaantuvia ja helposti puhdistettavia. Työpinnan tulee olla tasainen. Sekä steriili huone että puskurihuone on varustettu ultraviolettivaloilla. Steriilin huoneen ultraviolettivalot ovat 1 metrin päässä työpinnasta. Steriiliin huoneeseen saapuvan henkilökunnan on käytettävä steriloituja vaatteita ja hattua.
Tällä hetkellä steriilejä huoneita on enimmäkseen mikrobiologian tehtaissa, kun taas yleisissä laboratorioissa käytetään puhdaspöytiä. Puhdaspöydän päätehtävänä on laminaarisen ilmavirtauksen avulla poistaa erilaisia pieniä pölyhiukkasia, mukaan lukien mikro-organismeja, työpinnalta. Sähkölaite päästää ilman kulkemaan HEPA-suodattimen läpi ja sitten työtasolle, jolloin työtaso pysyy jatkuvasti steriilin ilman virtauksen hallinnassa. Lisäksi ulkopuolella olevalla sivulla on nopea ilmaverho, joka estää ulkoisten bakteerien pääsyn sisään.
Vaikeissa olosuhteissa puisia steriililaatikoita voidaan käyttää myös puhdaspöydän sijasta. Steriililaatikolla on yksinkertainen rakenne ja se on helppo siirtää. Laatikon etuosassa on kaksi reikää, jotka peitetään työntö-/veto-ovilla, kun sitä ei käytetä. Voit ojentaa kätesi sisään käytön aikana. Etuosan yläosa on lasitettu helpottamaan sisäistä käyttöä. Laatikon sisällä on ultraviolettilamppu, ja välineet ja bakteerit voidaan laittaa sisään sivussa olevan pienen oven kautta.
Aseptisilla leikkaustekniikoilla on tällä hetkellä keskeinen rooli paitsi mikrobiologisessa tutkimuksessa ja sovelluksissa, myös laajalti käytössä monissa bioteknologioissa, kuten transgeenisessä teknologiassa ja monoklonaalisten vasta-aineiden teknologiassa.
Julkaisun aika: 06.03.2024