Puhdastilassa on kaksi pääasiallista kontaminaatiolähdettä: hiukkaset ja mikro-organismit, jotka voivat johtua ihmisistä ja ympäristötekijöistä tai prosessiin liittyvistä toimista. Kontaminaatio pääsee silti tunkeutumaan puhdastilaan parhaista ponnisteluista huolimatta. Yleisiä kontaminaation kantajia ovat erityisesti ihmiskehot (solut, hiukset), ympäristötekijät, kuten pöly, savu, sumu tai laitteet (laboratoriolaitteet, puhdistusvälineet) sekä väärät pyyhkimistekniikat ja puhdistusmenetelmät.
Yleisin kontaminaation levittäjä on ihmiset. Vaikka käytössä olisi tiukimmatkin vaatetus ja toimintatavat, väärin koulutetut käyttäjät ovat suurin kontaminaatiouhka puhdastilassa. Työntekijät, jotka eivät noudata puhdastilan ohjeita, ovat riskitekijä. Yhden työntekijän tekemä virhe tai unohtama vaihe johtaa koko puhdastilan kontaminaatioon. Yritys voi varmistaa puhdastilan puhtauden vain jatkuvalla valvonnalla ja koulutuksen päivittämisellä, jolloin kontaminaatioaste pysyy nollana.
Muita merkittäviä kontaminaatiolähteitä ovat työkalut ja laitteet. Jos kärry tai kone pyyhitään vain karkeasti ennen puhdastilaan menoa, se voi tuoda sisään mikro-organismeja. Usein työntekijät eivät ole tietoisia siitä, että pyörillä varustetut laitteet pyörivät saastuneiden pintojen yli, kun niitä työnnetään puhdastilaan. Pintoja (mukaan lukien lattiat, seinät, laitteet jne.) testataan rutiininomaisesti elinkelpoisten bakteerien määrän varalta käyttämällä erityisesti suunniteltuja kontaktilevyjä, jotka sisältävät kasvualustaa, kuten Trypticase-soija-agaria (TSA) ja Sabouraud-dekstroosi-agaria (SDA). TSA on bakteereille suunniteltu kasvualusta, ja SDA on home- ja hiivalle suunniteltu kasvualusta. TSA:ta ja SDA:ta inkuboidaan tyypillisesti eri lämpötiloissa, ja TSA altistetaan 30–35 °C:n lämpötiloille, jotka ovat optimaalinen kasvulämpötila useimmille bakteereille. 20–25 °C:n lämpötila on optimaalinen useimmille home- ja hiivalajeille.
Ilman virtaus oli aikoinaan yleinen kontaminaation aiheuttaja, mutta nykyiset puhdastilan LVI-järjestelmät ovat käytännössä poistaneet ilman kontaminaation. Puhdastilan ilmaa valvotaan ja seurataan säännöllisesti (esim. päivittäin, viikoittain, neljännesvuosittain) hiukkasten määrän, elävien hiukkasten määrän, lämpötilan ja kosteuden suhteen. HEPA-suodattimia käytetään ilman hiukkasten määrän hallintaan, ja ne pystyvät suodattamaan hiukkaset jopa 0,2 µm:n kokoon asti. Näitä suodattimia pidetään yleensä käynnissä jatkuvasti kalibroidulla virtausnopeudella huoneen ilmanlaadun ylläpitämiseksi. Kosteus pidetään yleensä alhaisena, jotta estetään kosteassa ympäristössä viihtyvien mikro-organismien, kuten bakteerien ja homeen, lisääntyminen.
Itse asiassa puhdastilan korkein ja yleisin kontaminaatiolähde on käyttäjä.
Saastumisen lähteet ja pääsyreitit eivät vaihtele merkittävästi toimialoittain, mutta toimialojen välillä on eroja siedettävän ja sietämättömän saastumistasojen suhteen. Esimerkiksi nieltävien tablettien valmistajien ei tarvitse ylläpitää samaa puhtaustasoa kuin suoraan ihmiskehoon injektoitavien aineiden valmistajien.
Lääkevalmistajien sietokyky mikrobikontaminaatiolle on alhaisempi kuin huipputeknologiaa edustavien elektroniikkavalmistajien. Mikroskooppisia tuotteita valmistavat puolijohdevalmistajat eivät voi hyväksyä hiukkasmaista kontaminaatiota varmistaakseen tuotteen toimivuuden. Siksi nämä yritykset ovat huolissaan vain ihmiskehoon istutettavan tuotteen steriiliydestä ja sirun tai matkapuhelimen toimivuudesta. He ovat suhteellisesti vähemmän huolissaan homeesta, sienistä tai muista mikrobikontaminaation muodoista puhdastilassa. Toisaalta lääkeyritykset ovat huolissaan kaikista elävistä ja kuolleista kontaminaatiolähteistä.
Lääketeollisuutta sääntelee FDA, ja sen on noudatettava tiukasti hyvien valmistustapojen (GMP) määräyksiä, koska kontaminaation seuraukset lääketeollisuudessa ovat erittäin haitallisia. Lääkevalmistajien ei tarvitse ainoastaan varmistaa, että heidän tuotteensa ovat bakteereja vailla, vaan heidän on myös dokumentoitava ja seurattava kaikkea. Huipputeknologiaa valmistava laiteyritys voi toimittaa kannettavan tietokoneen tai television, kunhan se läpäisee sisäisen tarkastuksen. Mutta lääketeollisuudessa se ei ole niin yksinkertaista, minkä vuoksi on erittäin tärkeää, että yrityksellä on puhdastilan toimintaohjeet, ja että ne niitä käytetään ja dokumentoidaan. Kustannussyistä monet yritykset palkkaavat ulkopuolisia ammattimaisia siivouspalveluita suorittamaan siivouspalveluita.
Kattavan puhdastilan ympäristötestausohjelman tulisi sisältää näkyvät ja näkymättömät ilmassa olevat hiukkaset. Vaikka ei olekaan vaatimusta, että mikro-organismit tunnistavat kaikki näissä valvotuissa ympäristöissä olevat epäpuhtaudet, ympäristönvalvontaohjelman tulisi sisältää asianmukainen bakteerien tunnistaminen näytteistä. Nykyään on saatavilla useita bakteerien tunnistusmenetelmiä.
Bakteerien tunnistamisen ensimmäinen vaihe, erityisesti puhdastilan eristämisessä, on Gram-värjäysmenetelmä, koska se voi antaa tulkitsevia vihjeitä mikrobikontaminaation lähteestä. Jos mikrobien eristäminen ja tunnistaminen osoittaa grampositiivisia kokkeja, kontaminaatio on saattanut olla peräisin ihmisistä. Jos mikrobien eristäminen ja tunnistaminen osoittaa grampositiivisia sauvoja, kontaminaatio on saattanut olla peräisin pölystä tai desinfiointiaineille vastustuskykyisistä kannoista. Jos mikrobien eristäminen ja tunnistaminen osoittaa gramnegatiivisia sauvoja, kontaminaatio on saattanut olla peräisin vedestä tai mistä tahansa märästä pinnasta.
Mikrobien tunnistaminen lääketeollisuuden puhdastiloissa on erittäin tärkeää, koska se liittyy moniin laadunvarmistuksen osa-alueisiin, kuten biomäärityksiin valmistusympäristöissä, lopputuotteiden bakteerien tunnistustestaukseen, nimeämättömien organismien tunnistamiseen steriileissä tuotteissa ja vedessä, käymisvarastointiteknologian laadunvalvontaan bioteknologiateollisuudessa ja mikrobien testauksen varmentamiseen validoinnin aikana. FDA:n menetelmä bakteerien selviytymisen varmistamiseksi tietyssä ympäristössä yleistyy. Kun mikrobikontaminaatiotasot ylittävät määritellyn tason tai steriiliystestien tulokset osoittavat kontaminaatiota, on tarpeen varmistaa puhdistus- ja desinfiointiaineiden tehokkuus ja poistaa kontaminaatiolähteiden tunnistaminen.
Puhdastilan pintojen valvontaan on kaksi menetelmää:
1. Kosketuslevyt
Nämä erityiset viljelymaljat sisältävät steriiliä kasvualustaa, joka on valmistettu olemaan maljan reunaa korkeampi. Kontaktilevyn kansi peittää näytteenottopinnan, ja pinnalla näkyvät mikro-organismit tarttuvat agarin pintaan ja inkuboituvat. Tällä tekniikalla voidaan osoittaa pinnalla näkyvien mikro-organismien määrä.
2. Näytemenetelmä
Tämä on steriiliä ja säilytetään sopivassa steriilissä nesteessä. Tikku asetetaan testipinnalle ja mikro-organismi tunnistetaan ottamalla tikku takaisin liuokseen. Tikkuja käytetään usein epätasaisilla pinnoilla tai alueilla, joilta on vaikea ottaa näytettä kontaktilevyllä. Tikkunäytteenotto on pikemminkin kvalitatiivinen testi.
Julkaisun aika: 21.10.2024